产品货号:
BTN120653C
中文名称:
双链DNA地高辛标记试剂盒(填充法)
英文名称:
dsDNA 3-End DIG Fill-in Labeling Kit
产品规格:
30T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是基于填充法(Fill-in)的双链DNA 3'端标记试剂盒,提供的标记反应液整合了除酶和模板外的所有成分,简化了反应加样步骤,提高了标记反应的可重复性。
Klenow DNA聚合酶以5端突出的DNA为模板,在修补DNA 3'端的时候掺入标记了地高辛的核苷酸到新合成的DNA中,从而得到地高辛标记DNA探针。
- 使用无外切活性的Klenow exo- DNA聚合酶,已标记DNA探针不会被酶降解,探针产量更高。
- 快速,最快25分钟即可完成标记反应。
- 每次标记反应至少需要100ng(0.1μg)模板DNA。模板DNA必须是线状的、5'端突出的双链DNA,不能是平末端或3端突出的双链DNA。
- 掺入标记核苷酸的数量精准,适用于某些特殊的实验。但得到的探针比活不如随机引物法或PCR法制备的探针,因为掺入的标记核苷酸少。
组分 | 规格 |
5×Fill-in标记反应液(含地高辛标记的dNTP) | 120μL |
Klenow exo- DNA聚合酶 | 30μL |
超纯水 | 1mL |
保存:-20℃,有效期1年。
- 按下表设置反应:
成分 用量 线性DNA(水溶液) 0.1~4μg 5×Fill-in标记反应液(含地高辛标记的dNTP) 4μL Klenow exo- DNA聚合酶 1μL 超纯水 至20μL - 37℃孵育15分钟。
- 75℃下加热10分钟灭活Klenow exo- DNA聚合酶。
- 所得的标记DNA可以用于各种后续分析。
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